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工學(xué)院席鵬課題組為超分辨顯微引入全新維度
最近,北京大學(xué)工學(xué)院席鵬">席鵬課題組提出了一種新的基于偏振偶極子方位角的超分辨技術(shù),不僅為超分辨提供了一種全新的維度,而且為該領(lǐng)域近期的一個(gè)熱點(diǎn)爭論提供了解答。(Karl Zhanghao, et al., “Super-Resolution Dipole Orientation Mapping via Polarization Demodulation.” Light: Science & Applications, 2016. e16166. )
熒光的偏振特性(Fluorescence Polarization)早在1926年就被發(fā)現(xiàn)。然而在超分辨中,對(duì)于熒光的其他特性如強(qiáng)度、光譜、熒光壽命等均有很好的應(yīng)用,對(duì)于熒光偶極子的方向(偏振)則很少關(guān)注。2014年,Walla課題組在Nature Methods上發(fā)表文章,通過對(duì)激光進(jìn)行偏振調(diào)制來實(shí)現(xiàn)稀疏重構(gòu)的超分辨成像。而在本年年初,在Nature Methods期刊上,Keller等人則發(fā)表了針對(duì)這一文章的評(píng)論:利用熒光偏振不能夠獲得進(jìn)一步的超分辨。由此產(chǎn)生了一個(gè)有意思的爭論:偏振調(diào)制能否帶來超分辨信息?
Walla課題組和Keller課題組都是從傳統(tǒng)的熒光強(qiáng)度來看待這一問題,而席鵬">席鵬課題組的工作同時(shí)從熒光強(qiáng)度和熒光各向異性來考慮,將熒光的偶極子角度引入,成為區(qū)分熒光分子的第四維度,完美地回答了這一爭論。
傳統(tǒng)的熒光各向異性顯微成像技術(shù)往往只能夠觀察簡單樣本的熒光偏振;對(duì)于復(fù)雜樣本,熒光的偏振由于阿貝衍射極限的存在會(huì)受到眾多熒光團(tuán)的影響,從而只能觀察到平均效果。席鵬">席鵬課題組的SDOM(Super-resolution Dipole Orientation Mapping)技術(shù)同時(shí)觀察熒光的強(qiáng)度和偏振,從偏振調(diào)制數(shù)據(jù)中將空間強(qiáng)度信息和偏振信息解調(diào)出來,從而既提升了成像的空間分辨率,也提升了探測熒光團(tuán)偶極子方向的精度。同時(shí),SDOM技術(shù)具有很快的成像速度(最快可達(dá)每秒5幀超分辨),對(duì)激發(fā)光功率要求很低(毫瓦量級(jí)),非常適用于活細(xì)胞觀察。在本文中實(shí)現(xiàn)了對(duì)活體酵母細(xì)胞的觀察。
這一工作于10月21日發(fā)表在Nature旗下的Light:Science & Application。作者來自北京大學(xué)、清華大學(xué)和澳大利亞悉尼技術(shù)大學(xué),其中北京大學(xué)工學(xué)院博士生張昊是共同第一作者(排名第一),楊旭三、王淼妍是共同作者。工學(xué)院席鵬">席鵬教授是該工作的通訊作者。
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